中試生產(chǎn)是連接實(shí)驗(yàn)室研究與工業(yè)化生產(chǎn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),其核心設(shè)備——中試生產(chǎn)發(fā)酵罐的性能直接影響工藝放大效果和產(chǎn)品質(zhì)量。中試發(fā)酵罐通過(guò)模擬工業(yè)化生產(chǎn)條件,對(duì)菌種培養(yǎng)、代謝調(diào)控等工藝參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證和優(yōu)化,其系統(tǒng)組成需兼顧精確控制、穩(wěn)定運(yùn)行和操作便捷性。
1.中試發(fā)酵罐的罐體通常采用不銹鋼材質(zhì),具備耐腐蝕、易清潔和導(dǎo)熱性好的特點(diǎn)。罐體設(shè)計(jì)需滿(mǎn)足無(wú)菌操作要求,頂部配置快開(kāi)式人孔,便于投料和清洗;底部采用錐形或碟形結(jié)構(gòu),便于排料和減少死角。罐體內(nèi)部通常設(shè)置擋板,通過(guò)改變流體運(yùn)動(dòng)軌跡增強(qiáng)混合效果,防止菌體沉積。
2.罐體外部包裹保溫層,減少熱量損失,維持恒溫環(huán)境。部分設(shè)計(jì)采用夾套結(jié)構(gòu),通過(guò)循環(huán)蒸汽或冷卻水實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)控溫,溫度控制精度可達(dá)±0.5℃。對(duì)于高黏度培養(yǎng)體系,罐體可能配備磁力攪拌系統(tǒng),避免機(jī)械密封帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn)。
二、溫度控制系統(tǒng):代謝調(diào)控的關(guān)鍵
1.溫度是影響微生物生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物合成的核心參數(shù)。中試發(fā)酵罐的溫度控制系統(tǒng)由加熱模塊、冷卻模塊和智能控制器組成。加熱模塊通常采用電加熱棒或蒸汽盤(pán)管,快速提升罐內(nèi)溫度;冷卻模塊則通過(guò)循環(huán)冷卻水帶走代謝熱,維持溫度穩(wěn)定。
2.智能控制器通過(guò)溫度傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)罐內(nèi)溫度,并與設(shè)定值比對(duì)后自動(dòng)調(diào)節(jié)加熱/冷卻功率。例如,在抗生素發(fā)酵過(guò)程中,菌體生長(zhǎng)階段需維持30-32℃,而產(chǎn)物合成階段可能需降至25-28℃,溫度控制系統(tǒng)需實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)切換。部分高*設(shè)備還配備溫度梯度模擬功能,可模擬工業(yè)化生產(chǎn)中的局部溫度差異。
三、中試生產(chǎn)發(fā)酵罐通氣與攪拌系統(tǒng):氧氣傳遞的保障
1.微生物生長(zhǎng)需要充足的溶解氧,中試發(fā)酵罐通過(guò)通氣與攪拌系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)氧氣的高效傳遞。通氣系統(tǒng)由空氣過(guò)濾器、流量計(jì)和氣體分布器組成,空氣經(jīng)0.2μm濾芯除菌后,通過(guò)微孔或環(huán)狀分布器均勻注入罐內(nèi)。流量計(jì)可精確控制通氣速率(VVM值)。
2.攪拌系統(tǒng)則通過(guò)渦輪式或推進(jìn)式攪拌槳產(chǎn)生剪切力,將大氣泡破碎為微小氣泡,增加氣液接觸面積。攪拌轉(zhuǎn)速和槳葉類(lèi)型需根據(jù)菌體特性?xún)?yōu)化:例如,酵母菌培養(yǎng)可采用六彎葉渦輪槳,而絲狀真菌則需低剪切力的推進(jìn)槳。部分設(shè)備還配備在線(xiàn)溶氧電極,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)溶解氧濃度(DO值),并通過(guò)PID控制自動(dòng)調(diào)節(jié)通氣或攪拌參數(shù)。
四、中試生產(chǎn)發(fā)酵罐補(bǔ)料與消泡系統(tǒng):工藝優(yōu)化的支撐
1.中試發(fā)酵常采用分批補(bǔ)料策略,通過(guò)補(bǔ)料系統(tǒng)精確添加碳源、氮源或前體物質(zhì),延長(zhǎng)產(chǎn)物合成期。補(bǔ)料系統(tǒng)由儲(chǔ)料罐、蠕動(dòng)泵和流量計(jì)組成,可實(shí)現(xiàn)恒速或反饋補(bǔ)料。
2.發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的泡沫會(huì)占據(jù)罐體有效容積,甚至導(dǎo)致逃液。消泡系統(tǒng)通過(guò)機(jī)械消泡槳(破泡器)和化學(xué)消泡劑(如硅油或植物油)協(xié)同作用,快速消除泡沫。在線(xiàn)泡沫傳感器可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)泡沫高度,自動(dòng)觸發(fā)消泡程序,避免人工干預(yù)導(dǎo)致的污染風(fēng)險(xiǎn)。
